Ksantoproteinovaya reagim te proteinave: shenja dhe ekuacionit formula

Në mënyrë për të krijuar përbërjen cilësore e shumë ushqime të përdorura reagim ksantoproteinovaya ndaj proteinave. Prania e amino acideve aromatike në përzierje do të ndryshojë në një ngjyrë pozitive mostër testi.

Çfarë është proteina

Ajo është quajtur gjithashtu një proteinë, e cila është një material ndërtimi për trup të gjallë. Proteinat ruajtur madhësia e muskujve, rivendosjen e strukturave të plagosur dhe të vdekur indet e organeve të ndryshme, të jetë ajo e flokëve, lëkurës dhe ligamentet. Me pjesëmarrjen e tyre, prodhon rruazat e kuqe të gjakut, është i qeverisur nga funksionimin normal e shumë hormoneve dhe qelizat e sistemit imunitar.

Kjo është një molekulë kompleks që është një polipeptid që kanë një masë të madhe se 6 ~ 10 ³ daltonë. strukturë proteinë formimin mbetje acide amino ne nje numer te madh lidhjeje shoqëruar peptide.

Struktura e proteinave

Tipar dallues i këtyre substancave krahasuar me peptides peshë të ulët molekulare është që ata të zhvilluar një strukturë tre-dimensionale hapësinor, i mbështetur efekte me shkallë të ndryshme të tërheqjes. Proteinat posedojnë katër-strukturë. Për secilin prej tyre ka karakteristikat e veta.

Si baza e organizimit primar të molekulave të prejardhura sekuencë amino acid, strukturën cili njeh reaksion ksantoproteinovaya te proteinave. Kjo strukturë është një periodikisht përsëritur lidhja peptide -HN-CH-CO-, një selektive radikalet pjesë janë zinxhirët anësore në aminoacide. Ata përcaktojnë vetitë mëtejshme të substancës si një e tërë.

strukturë proteina primar konsiderohet mjaft të fortë, kjo është për shkak të prezencës së bashkëveprimit të forta kovalente në lidhje peptide. Formimi i niveleve të mëvonshëm ndodh varësisht nga atributet e përcaktuara në fazën fillestare.

Formimi i strukturës sekondare është e mundur për shkak të gjarpërues të sekuencës amino acide ne nje spirale, në të cilën obligacione hidrogjen janë vendosur ndërmjet kthehet.

niveli terciar i organizimit e molekulës është i formuar duke aplikuar një pjesë të spirale me fragmente të tjera me shfaqjen e gjitha lidhjet e mundshme ndërmjet tyre, me disulfide hidrogjen, kovalente ose komponimi jonik. Rezultati është shoqata në formën e rruazat.

Rregullimi hapësinor i strukturave terciare, me formimin e lidhje kimike ndërmjet tyre çon në formimin e formës përfundimtare të molekulës ose nivele kuaternar.

amino acidet

Ato shkaktojnë vetitë kimike të proteinave. Ka rreth 20 amino acide të mëdha që përbëjnë polypeptides në një sekuencë të ndryshme. Kjo gjithashtu referohet acid rralla aminokarboksilik në formë hydroxyproline dhe hydroxylysine rrjedh peptid bazë.

Si një shenjë e njohjes ksantoproteinovaya reagimit proteina, prania e amino acideve të caktuara siguron ndryshimin e ngjyrës e reagents, duke sugjeruar praninë e strukturave të veçanta në përbërjen e tyre.

Siç doli, ata janë acide karboksilike që kanë ndodhur zëvendësimin e atomin hidrogjen në grupit amino.

Një strukturë shembull e molekulës mund të shërbejë një formulë strukturore të glycine (HNH- HCH- COOH) si amino acid thjeshte.

Në këtë rast, një e hidrogjenët CH ₂ - karbon mund të zëvendësohet nga një më shumë radikale qe permban nje unaze benzene, amino, sulfo, karboksi.

Çfarë bën reaksion ksantoproteinovaya

Për analiza cilësore e proteinave duke përdorur teknika të ndryshme. Këto përfshijnë reagime:

• biuret me shfaqjen e ngjyrës vjollcë;
• ninhydrin për të formuar një solucion blu-vjollcë;
• formal me krijimin e një ngjyrë të kuqe;
• Nogier të beftë ngjyrën gri-zi.

Në kryerjen e çdo metodë e provuar praninë e proteinave dhe praninë e grupeve të caktuara funksionale në molekulë e tyre.

Ka ksantoproteinovaya reagim ndaj proteinave. Ajo është quajtur gjithashtu avari Mulder. Referohet reagimeve ngjyra për proteinat, në të cilën janë aromatike dhe heterociklike amino acide.

Karakteristikë e një procesi të tillë mostrës është azotizim acid nitrik mbetjet amino acide ciklik, në veçanti e pranimit i grupit nitro të unazës benzen.

Rezultat i këtij procesi është formacioni i komponimeve nitro, të cilat precipituar. Kjo është themelore reagimi tipar ksantoproteinovaya.

Atë që përcaktohet aminoacideve

Jo të gjithë acid aminokarboksilik mund të zbulohen duke përdorur një mostër të tillë. Tipar kryesor i proteinave ksantoproteinovaya reaksionit zbulimit - prania e unazës benzen ose unaza heterociklike ne amino acidet molekulës.

Sepse proteina është i izoluar nga acidet aminokarboksilik dy aromatike, në të cilën ekziston një grup fenil (për phenylalanine), dhe një radikal hidroksifenil (në tyrosine).

Me reaksion ksantoproteinovaya përcaktohet triptofanit heterociklike amino acid, indole që ka një bërthamë aromatike. Prania e komponimeve të mësipërme në proteina jep ndryshimin karakteristike ngjyra e mjedisit test.

Çfarë reagents përdorimi

Për kryerjen e reagimin ksantoproteinovaya ajo ka nevojë për të përgatitur një zgjidhje 1% të proteinave vezë, ose me origjinë bimore.

Zakonisht përdoret vezë, e cila është ndarë për ndarjen e mëtejshëm të proteinave nga verdhë veze. Për një zgjidhje 1% të proteinës është holluar në një sasi dhjetëfish e ujit të pastrohet. Pas shpërbërjes së rezulton të lëngshme e proteinave duhet të filtrohen përmes disa shtresa të napë. Kjo zgjidhje duhet të ruhen në një vend të freskët.

Është e mundur për të kryer reagimin me një proteinave bimore. Për të përgatitur zgjidhje është përdorur miellin e grurit në vlerë prej 0.04 kg. 0.16 l e ujit të pastrohet. Përbërësit janë të përziera në një balonë të cilin është i lidhur për 24 orë në një vend të ftohtë në një temperaturë prej rreth + 1 ° C. Në fund të ditës zgjidhja u ngrit në këmbë, i ndjekur nga filtrimit të tij të parë me pambuk dhe pastaj - një letër palosur filtër. Të lëngshme që rezulton është mbajtur në një vend të freskët. Kjo zgjidhje është kryesisht i pranishëm në pjesë albumina.

Për kryerjen e ksantoproteinovaya reaksionit si reagent përdoret conc kryesore acid nitrik. reagente tej eshte nje solucion 10% hidroksid natriumi ose amoniakut, zgjidhje xhelatinë dhe fenol unconcentrated.

Metodologjia e

Në një tub të pastër është bërë zgjidhje 1% proteina vezë -th ose miell në vlerë prej 2 ml. Për këtë është shtuar rreth 9 pika të acidit nitrik të koncentruar për flocculation ndalur. Përzierje rezultuar ishte ndezur, duke rezultuar beftë të verdhë gradualisht zhduket dhe ngjyra e saj shkon në zgjidhje.

Kur lëngshme fitilin poshtë në tub përgjatë murit shtuar rreth 9 pika hidroksid natriumi, të përqendruar, e cila është e tepërt për procesin. reagimi medium bëhet alkaline. Përmbajtja bëhet ngjyrë portokalli në provëz.

Karakteristikat e

Që ksantoproteinovaya quajtur reagim cilësor ndaj acidit nitrik nga veprimi i proteinave, mostra është kryer nën përfshirë kapuç tym. Ajo vëren të gjitha masat e sigurisë kur punojnë me substanca kaustike koncentruar.

Lirimin e përmbajtjes nga tubi mund të ndodhin gjatë procesit të ngrohjes që duhet të merren parasysh kur fiksimin atë në një mbajtës dhe zgjedhjen e prirje.

Stringing përqendruar acid nitrik dhe sodë kaustike duhet vetëm duke përdorur një tubth xhami dhe dardha gome tubth ndalohet me gojë.

reaksioni relative me fenol

Për qartësi, procesin dhe konfirmimin e pranisë së grupeve fenil është kryer me një hidroksi ngjashme mostër.

Tubi bërë 2 ml fenol holluar, pastaj gradualisht përgjatë murit, është shtuar 2 ml acid nitrik koncentruar. Zgjidhja është nënshtruar ngrohje, ku ajo bëhet e verdhë. Ky reagim është cilësia e pranisë së unazës benzen.

Procesi hidroksi nitrate me acid nitrik i pasuar nga formimi i një përzierje e p-nitrofenole dhe o-nitrophenol në përqindje e 15 deri ne 35.

Testi Krahasimi me xhelatinë

Për të provuar se reaksioni ksantoproteinovaya te proteines tregon një amino acid me strukturë aromatike, përdorimi proteina që nuk kanë një grup fenolike.

Në një tub të pastër është bërë 1% zgjidhje xhelatinë në një sasi prej 2 ml. Për këtë është shtuar rreth 9 pika të acidit nitrik të koncentruar. Përzierje rezultuar është i nxehtë. Zgjidhje nuk është ngjyrë në verdhe, e cila tregon mungesën e amino acideve me një strukturë aromatike. Ndonjëherë ka një yellowing e lehtë e mjedisit për shkak të pranisë së papastërtive proteinave.

ekuacionet kimike

Në dy reagimin hap shkon ksantoproteinovaya proteina. Formula pare proces azotizim fazë pershkruan molekula e acidit amino duke acid nitrik i koncentruar.

Një shembull është bashkangjitur i grupit nitro te tyrosine per te formuar nitrotyrosine dhe dinitrotirozina. Në rastin e parë të unazës benzen është bashkangjitur një NO ₂ -radical, dhe përbërësi i dytë kanë dy atome hidrogjeni zëvendësohen nga _NO2. Kimik formula ksantoproteinovaya tyrosine reagim të përfaqësuar nga reagimi me acid nitrik te formuar molekulë nitrotyrosine.

Procesi nitritim shoqërohet nga tranzicionit Ngjyrosje pangjyrë në ton të verdhë. Në kryerjen e këtij reaksion me proteinat që përmban amino acidin mbetjet phenylalanine ose triptofan, dhe ngjyra e ndryshimeve zgjidhje.

Hapi i dytë është produkt reaksioni i denitrifikimit e molekulave tirozines, veçanërisht nitrotyrosine me amoniak ose hidroksid natriumi. Rezultati është një natriumi ose amonit kripë në të cilën ngjyrë të verdhë-portokalli. një reagim i tillë është i lidhur me mundësinë e molekulave nitrotyrosine lëvizin në formë quinoid. Më pas kripë formuar prej tyre acid nitronic, e cila ka një sistem kinone të lidhjeve konjuguara të dyfishta.

Kështu përfundon reagimin ksantoproteinovaya ndaj proteinave. Ekuacioni i paraqitur më lart hapin e dytë.

rezultatet

Gjatë analizës së lëngjeve të përfshira në tre tubave, zgjidhja referencë është holluar me fenol. Substanca me nje unaze benzen qe japin reaksion kualitativ me acid nitrik. Si rezultat, ajo ndryshon ngjyra e zgjidhjes.

Sa është e njohur, xhelatinë përbëhet nga një formë hydrolyzed kolagjeni. Proteina nuk përmban strukturë aromatike e aminoacideve. Asnjë ndryshim në ngjyrën e mesme nga reagimi me një acid.

Në tub e tretë provë ka një reagim pozitiv për proteina ksantoproteinovaya. Mund të konkludohet si vijon: të gjitha proteinat me strukturë aromatike, qoftë të jetë një grup fenil ose një unazë indole, dhënë ndryshimi në ngjyrë së solucionit. Kjo është për shkak të formimit e komponimeve nitro me një ngjyrë të verdhë.

Kryerja e një reaksion ngjyrë dëshmon praninë e strukturave të ndryshme kimike në aminoacidet dhe proteinat. Shembulli xhelatinë tregon që përbërja perfshin acidit aminokarboksilik jo që ka një grup fenil ose një strukturë ciklike.

Me ksantoproteinovaya reagimit mund të shpjegohet me yellowing e lëkurës kur zbatohet në të një acid të fortë nitrik. Të njëjtën ngjyrë do të bëhet qumësht i lehtë gjatë analizën e saj të ngjashme.

Në praktikë laboratorike klinike kjo mostër ngjyra nuk është përdorur për zbulimin e proteinave në urinë. Kjo është për shkak të ngjyrës së verdhë të vetë urinës.

Ksantoproteinovaya reaksion u përdorur gjithnjë për sasior të amino acideve të tilla si triptofanit dhe tyrosine si pjesë e proteinave të ndryshme.