Analiza e PCR: çfarë është ajo? Si për të marrë analizën PCR

Ajo jo shumë kohë më parë ka zhvilluar një metodë të besueshëm, shumë të ndjeshme dhe të shpejtë për diagnostikimin e sëmundjeve të ndryshme infektive tek njerëzit. një metodë e tillë është quajtur "Analiza e PCR". Çfarë është kjo, ajo që është thelbi i tij, atë që ai mund të identifikojë mikroorganizmave dhe si për të marrë atë, ne do të përshkruaj në këtë artikull.

Historia e zbulimit

Shpiku reaksion zinxhir polimeraza (PCR) është një shkencëtar amerikan Keri Myullis në vitin 1983. Fillimisht, patentuar metodë e diagnostikimit nga "Cetus Corporation", në të cilën ai ka punuar dhe krijuesi i tij. Por në vitin 1992 të gjitha të drejtat dhe patentat janë shitur kompanisë "Hoffman-La Roche". Pas kësaj, doli se studime të ngjashme janë kryer paralelisht dhe janë raportuar nga biologë të tjerë amerikanë, të tilla si Elis Chen, David Edgar, John RRE. Në vitin 1980 ai e angazhuar në këtë çështje dhe shkencëtarët sovjetike A. Slyusarenko A. Kaledin dhe S. Gorodetsky. Prandaj, për të përcaktuar pronar i vetëm të drejtës së autorit nuk ka qenë e mundur. Shumë biokimistë shquar kanë kontribuar në zhvillimin e metodave të reagimit polimerazës dhe CERN patentuar risitë e tyre. Në këtë analizë pikë të PCR kryhet në të gjithë laboratorët e pajisur posaçërisht.

PËRMBLEDHJE PCR diagnostikues

Analiza e PCR: çfarë është ajo dhe si e bën këtë punë? Esenca e metodës qëndron në faktin që duke përdorur një polimerazë veçantë ADN enzimë in vitro për të rritur në volum mjedis specifik mikrobial. Për ta bërë këtë material të ADN-së në mënyrë të përsëritur shumohen në dispozicion. Kështu, prania e një patogjen në një mostër shuma do të rritet në kurriz të manipulimit laboratorike biokimike, dhe bakteret nuk do të jetë e vështirë për të zbuluar në mikroskop.

Sa është studimi i materialit?

Për të kryer analizën e kërkuar:

• Shablloni DNA;
• primers material lidh skajet e fragmentit;
• termombjatës enzimë polymerase DNA;
• kimike, të siguruar funksionimin e duhur të enzimeve;
• zgjidhje tampon është e nevojshme për krijimin e kushteve të përshtatshme për rritjen dhe zhvillimin e materialeve të ADN-së.

Për të kryer PCR të veprojë 25-30 përsërit përbërë nga tre hapa: denaturation, Pjekja dhe zgjatjen.

Për të analizuar polimezarnoy reaksion zinxhir duke përdorur një pajisje të veçantë - çiklist. Pajisje moderne ju lejon për të instaluar të nevojshëm të ngrohjes dhe tuba ftohjes program për të eliminuar gabimet gjatë diagnozës.

Ku të aplikoni diagnozën?

Polimezarnoy metodë reaksion zinxhir janë përdorur në fusha të ndryshme të mjekësisë:

• Përdorimi i mjekësisë ligjore që të identifikojnë materialin gjenetik, të tilla si flokët, pështymë apo gjak;
• Analiza PCR i gjakut ndihmon për genotyping, psh për zbulimin e përgjigjes individuale gjenetike mbjellë në një droge të caktuar;
• nga një metodë të vendosur lidhjet familjare midis njerëzve;
• më i kërkuar PCR metodë është bërë në diagnozën mjekësore për përcaktimin e sëmundjeve të ndryshme infektive.

Çfarë infeksione zbulon PCR?

Kështu, mjekësia ka qenë prej kohësh përdorur me sukses analiza PCR. Çfarë është ajo, ne kemi mësuar tashmë. Dhe disa patogjene mund të zbulohet me të? PCR diagnostikuar mëposhtme infeksionet :

• hepatitit A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• klamidia;
• mycoplasmosis;
• vaginoza bacterial;
• mononukleoza infektive;
• trichomoniasis;
• infeksion HPV;
• tuberculosis;
• infeksion herpes i 1 dhe tipit 2;
• Helicobacter infeksion pylori;
• citomegalovirusi;
• difteria;
• salmonellosis;
• infeksionit HIV.

Gjithashtu, metodat e PCR janë përdorur në diagnozën e kancerit.

Përparësitë e metodës

Diagnostike PCR ka disa avantazhe:

1. ndjeshmëri të lartë. Edhe me vetëm një molekulat e ADN-mikroorganizëm disa analiza PCR përcakton praninë e infeksionit. Ajo i ndihmon metodë për sëmundjet kronike dhe latent ndodhin. Shpesh në raste të tilla, mikroorganizmi është djerrë në mënyra të tjera.
2. Në mënyrë për të hetuar ndonjë material të përshtatshëm, të tilla si pështymë, gjak, përzgjedhjen seksuale, flokët, qelizat epiteliale. Më e zakonshme është një test i gjakut dhe shtupë urogjenital PCR.

3. Nuk kërkojnë një zgjeruara kulturat rritje. Procesi i automatizuar i diagnostifikimit lejon që të marrë rezultatet e një studimi pas 4-5 orësh.
4. Metoda është pothuajse tërësisht autentik. Regjistruar raste të izoluara vetëm i rezultatit rreme-negative.
5. Aftësia për të identifikuar disa lloje të patogjenëve në një material të mostrës. Kjo jo vetëm që përshpejton procesin e diagnostikimit të sëmundjes, por edhe në mënyrë të konsiderueshme zvogëlon shpenzimet materiale. Shpesh, mjeku përshkruan një analizë të plotë të PCR. Sondazhi Çmimi, i përbërë nga përcaktimin e gjashtë patogjene, është rreth 1500 rubla.

Rekomandime për përgatitjen për analizë

Rezultatet të jenë të vlefshme studimet PCR duhet të testohen, duke ndjekur rekomandimet e përgatitjeve paraprake për diagnozën:

1. Para dorëzimit të pështymë duhet të përmbahen nga të hahet dhe drogës për 4 orë para se të mostrave të materialit. Menjëherë para fillimit të procedurës, shpëlarje gojën tuaj me ujë të zier.
2. Rregullat e mësipërme duhet të udhëhiqet dhe kur të marrë mostra nga brenda e faqe. Pas shpëlarje është e rekomanduar për të kryer një masazh të lehtë në lëkurë për lirimin sekrecionet prostatic.
3. Urina është mbledhur zakonisht në shtëpi. Për ta bërë këtë, ju keni nevojë për të kryer një banjë të plotë të organeve gjenitale. Në një enë plastike sterile është e nevojshme për të mbledhur 50-60 ml të urinës. Është e rekomanduar për gratë për të futur tampon në vaginë, dhe njerëzit sa më shumë të jetë e mundur për të tërhequr lëkurë dele për të siguruar pastërtinë e materialit. Ju nuk mund të marrë materialin gjatë menstruacioneve.
4. Për dërgimin e spermës të abstenojnë nga marrëdhëniet seksuale gjatë 3 ditë para mbledhjes së materialit. Gjithashtu, mjekët këshillohen të braktisin përdorimin e sauna dhe dush të nxehtë, alkooli dhe ushqimet pikante. Për 3 orë para se të analizës është e nevojshme që të përmbahen nga urinimi.
5. Për të kaluar shpifje urogjenital, për shembull, nëse analiza në një klamidia PCR, të dy gratë dhe burrat është e rekomanduar atë prehje seksuale për 3 ditë. 2 javë para analizë nuk mund të marrë antibiotikë. Për një javë ju duhet për të ndaluar përdorimin e gels intime, ointments, suppositories vaginale, douching. 3 orë para studimit duhet të përmbahen nga urinimi. Gjatë material gardh menstruacioneve nuk është kryer, vetëm 3 ditë pas përfundimit të diktim mund të marrë shpifjeve urogjenital.

PCR gjatë shtatzënisë

Periudha e pritjes për një fëmijë, shumë sëmundje infektive, sëmundjet seksualisht të transmetueshme, janë jashtëzakonisht të rrezikshme për zhvillimin normal të fetusit. IST mund të shkaktojnë zhvillimin intrauterine, lindjes abort apo parakohshme, keqformime kongjenitale të fëmijës. Prandaj, është e rëndësishme për të marrë në shtatzëninë e hershme të shqyrtimit PCR. Pass analiza është e nevojshme gjatë regjistrimit - deri në 12 javë.

Materiali gardh vjen nga kanali i qafës së mitrës me një brushat të veçanta. Procedura është pa dhimbje dhe nuk përbën rrezik për fëmijën. Normalisht gjate shtatzanise analizuar për metodën Chlamydia PCR, si dhe ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus. Kompleksi i tillë ekzaminim të quajtur PCR 6.

PCR për diagnozën e HIV

Për shkak të faktit se metoda e reaksionit zinxhir polymerase është shumë e ndjeshme ndaj ndryshimeve në trup dhe kushtet e diagnozës, shumë faktorë mund të ndikojnë në rezultatin. Prandaj analiza PCR për infeksionin HIV nuk është një metodë e besueshme, efikasiteti i saj - 96-98%. Pjesa e mbetur prej 2-4% e testit jep rezultate të rreme pozitive.

Por në disa situata, pa diagnozë PCR e HIV-it nuk mund të bëjë. Zakonisht, ajo është kryer për njerëzit me të rreme-negative ELISA. Këto shifra tregojnë se personi nuk ka zhvilluar ende antitrupa të virusit dhe nuk mund të zbulohet pa rritjen e numrit të shumta. Se kjo mund të arrihet duke bërë një test të gjakut metodë PCR.

Gjithashtu e nevojshme është një diagnozë e fëmijëve viti i parë i jetës, i lindur për nënat HIV-pozitive. Metoda është e vetmja mënyrë për të përcaktuar besueshme statusin e fëmijës.

PCR për diagnozën e hepatitit

Polimerazës metodë reaksion zinxhir lejon zbulimin e ADN-së e virusit të hepatitit A, B, C, dhe para formimit e antitrupave të infeksionit ose simptomave fillimit. Veçanërisht efektive është analiza PCR mbi hepatitin C, pasi 85% e sëmundjeve të tilla janë asimptomatike dhe pa trajtim në kohë bëhet kronik.

Zbulimi me kohë i patogjen do të ndihmojë për të shmangur komplikime dhe trajtim afat-gjatë.

shqyrtimit Integruar PCR

Gjithëpërfshirës PCR Analiza: çfarë është ajo? Kjo shqyrtimit metodë polimezarnoy reaksion zinxhir që përfshin përcaktimin njëkohësisht disa infeksion llojeve: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, candida, Trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, 1 herpes dhe tipi 2, gonorrea papillomavirus. Çmimi i kësaj diagnoze varion nga 2,000 deri në 3,500 rubla. në varësi të klinikës, materialet dhe pajisjet, si dhe nga lloji i analizës: ne cilesi dhe sasi. Ajo që është e nevojshme në rastin tuaj - mjeku vendos. Në disa raste, ju thjesht të zbuluar praninë e patogjen në të tjerët, të tilla si HIV, rolin e rëndësishëm të luajtur nga titrit sasiore. referuar si "analizë PCR 12" në diagnozën e të gjithë e më lart provimit patogjene.

Deshifrimin rezultatet e analizave

Analiza Transcription PCR është e drejtpërdrejtë. Nuk janë vetëm 2 shkallë Indeksi - ". Negative" "pozitiv" dhe Me zbulimin e patogjenit mund mjekët me% besim 99 -th konfirmuar praninë e sëmundjes dhe për të filluar trajtimin e pacientit. Në metodën sasiore e përcaktimit të infeksionit në një numër korrespondues tregues kolona e baktereve të zbuluara do të specifikohen. Vetëm një mjek mund të përcaktojë shtrirjen e sëmundjes dhe të përshkruajë trajtimin e nevojshëm.

Në disa raste, për shembull, në përcaktimin e infeksionit HIV nga PCR, me një rezultat negativ, ka nevojë për sondazhe të tjera për të konfirmuar këto shifra.

Ku mund të merrni testuar?

Ku kalojnë-PCR analiza në klinikë publik apo një laborator privat? Për fat të keq, në pajisjet komunale mjekësore institucioneve dhe metodat janë vjetëruar shpesh. Prandaj është më mirë të japë përparësi për laboratorët private me pajisje moderne dhe personel të kualifikuar. Përveç kësaj, në një klinikë private ju të merrni rezultatet shumë më të shpejtë.

Në Moskë, shumë laboratore private ofrojnë analiza PCR për infeksionet e ndryshme. Për shembull, në klinika të tilla si "Vita", "Klinika Integruar", "të lumtur familjare", "Uro-Pro", kryer analiza PCR. çmimi Anketa është 200 rubla. për përcaktimin e një patogjen.

Mund të konkludohet se diagnoza e sëmundjeve infektive nga PCR në shumicën e rasteve është një mënyrë të shpejtë dhe të besueshëm të zbulimin e patogjen në trup në fazat e hershme të infeksionit. Megjithatë, në raste të caktuara, për të zgjedhur metoda të tjera të diagnozës. Përcaktojë nevojën për një studim të tillë mund të jetë vetëm një specialist. PCR Analiza Decryption gjithashtu kërkon një qasje profesionale. Ndiqni këshillën e mjekut tuaj dhe nuk japin testet e tyre, të cilat nuk janë të nevojshme.